新色譜柱的首次活化是確保其性能和延長(zhǎng)使用壽命的重要步驟。以下是一個(gè)詳細(xì)的活化流程,適用于大多數(shù)反相HPLC色譜柱:
1、檢查色譜柱適用的流動(dòng)相:
在開始活化之前,務(wù)必確認(rèn)色譜柱說明書中推薦的流動(dòng)相類型。
2、連接色譜柱與設(shè)備:
將色譜柱正確連接到液相色譜儀上,注意避免氣泡進(jìn)入系統(tǒng)。
3、初步清洗:
使用甲醇作為初始溶劑進(jìn)行清洗,流速設(shè)置為每小時(shí)幾個(gè)柱體積(通常為0.5-1mL/min),時(shí)間大約為30分鐘至1小時(shí)。這一步可以去除生產(chǎn)和運(yùn)輸過程中可能殘留的污染物。
4、進(jìn)一步清洗:
接著用乙腈或甲醇繼續(xù)沖洗色譜柱,流速同樣保持在每小時(shí)幾個(gè)柱體積,持續(xù)約30分鐘至1小時(shí)。這有助于去除更頑固的雜質(zhì)。
5、平衡色譜柱:
最后,使用實(shí)際分析時(shí)將要使用的流動(dòng)相來平衡色譜柱,流速可適當(dāng)提高至每小時(shí)幾個(gè)柱體積,持續(xù)約30分鐘至1小時(shí)。這一步是為了使色譜柱適應(yīng)最終的分析條件。
6、注意事項(xiàng):
在整個(gè)活化過程中,應(yīng)保持恒定的流速,避免突然的壓力變化。確保所有溶劑都是高純度的,并且經(jīng)過過濾,以防止顆粒物進(jìn)入色譜柱。如果色譜柱長(zhǎng)時(shí)間未使用,建議定期進(jìn)行維護(hù)清洗,以保持其性能。
7、特殊類型的色譜柱:
對(duì)于正相色譜柱或其他類型的色譜柱,活化步驟可能有所不同,具體應(yīng)參照制造商提供的指南進(jìn)行操作。
通過以上步驟,可以有效地活化新色譜柱,確保其在后續(xù)的分析工作中提供穩(wěn)定且可靠的性能。
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